Selective Staphylococcus lugdunensis(SSL) medium: อาหารเลี้ยงเชื้อสำหรับคัดเลือกS.lugdunensis

การเพาะเชื้อแบคทีเรียจากตัวอย่างแผลหรือหนองของผู้ป่วย เชื้อก่อโรคที่ได้ส่วนใหญ่คือ Staphylococcus aureus แต่เชื้อ Staphylococci อื่นๆที่ไม่สร้างเอนไซม์ coagulase (Coagulase negative Staphylococci: CoNS)ก็มีรายงานการก่อโรค รวมถึง Staphylococcus lugdunensis แต่อัตราการรายงานพบเชื้อในตัวอย่างแผลหรือหนองยังน้อยกว่า S.aureus อาจเป็นเพราะในตัวอย่างมักจะมีเชื้อหลายชนิดปนกันอยู่จริงแยกเชื้อได้ยาก และเชื้อเป็น CoNS จึงแยกออกจากเชื้อ CoNS อื่นที่เป็น normal flora ได้ยาก

จึงมีความพยายามพัฒนาอาหารเลี้ยงเชื้อสำหรับคัดเลือกเชื้อ S.lugdunensis จากตัวอย่างหนองหรือแผล

Selective Staphylococcus lugdunensis(SSL) medium:

ส่วนประกอบในอาหารเลี้ยงเชื้อ 1 ลิตร

  • Giolitti-Cantoni broth 54.2 g
  • Sodium chloride 45 g
  • L-ornithine monohydrochloride 10 g
  • Agar 15 g
  • Potassium nitrate 1 g
  • Deferoxamine mesylate 0.1 g
  • Uracil 0.01 g
  • Pyridoxal hydrochloride 0.005 g
  • Hemin 0.005 g
  • Vitamin K1 0.0005 g
  • Bromocresol purple 0.02 g
  • Phenol red 0.01 g

หลักการคัดเลือกเชื้อ S.lugdunensis

เชื้อ  S.lugdunensis สร้างเอนไซม์ ornithine decarboxylase(ODC) ไปทำปฏิกิริยากับ L-ornithine ทำให้อาหารเป็นด่างมากขึ้น (pH เพิ่มขึ้น) ไปเปลี่ยนสี indicator ให้เป็นสีม่วง นอกจากนี้ยังมี NaCl ช่วยยับยั้งเชื้ออื่นที่ไม่ทนเกลือ(salt-intolerant bacteria) และมี deferoxamine mesylate ช่วยยับยั้งเชื้อ S.epidermidis ซึ่งบางสายพันธุ์สามารถสร้าง ODC ได้

SSL medium แสดงการเจริญของเชื้อ S.lugdunensis (ลูกศรสีดำ) และ S.aureus (ลูกศรสีขาว)
SSL medium แสดงการเจริญของเชื้อ S.lugdunensis (ลูกศรสีดำ) และ S.aureus (ลูกศรสีขาว)

คุณสมบัติความเป็น selective medium: เมื่อเพาะเชื้อบน SSL medium ภาวะ anaerobic นาน 48 ชั่วโมง

S.lugdunensis : colony สีเทามีวงแหวนสีม่วง อาหารเลี้ยงเชื้อรอบๆ colony จะไม่มีสี

S.epidermidis : colony ขนาดเล็กมากเป็น pinpoint เพราะถูกยับยั้งการเจริญ และในบริเวณที่มีเชื้อเจริญเยอะจริงๆอาจจะเห็นอาหารรอบๆไม่มีสีได้ แต่จะไม่มีวงแหวนสีม่วง

Staphylococci อื่นๆ : colony มีขนาดใหญ่ประมาณ 2-3 mm แต่ไม่มีวงแหวนสีม่วง

Vibrio parahaemolyticus : เป็นเชื้อที่เจริญในภาวะ anaerobe และมีวงแหวนสีม่วง แต่สีของcolonyออกสีน้ำเงินเขียว ซึ่งต่างจาก S.lugdunensis ที่จะเป็นสีเทา

ความไว(sensitivity)ในการทดสอบกับตัวอย่างแผลหนองจากผู้ป่วย

SSL มีความไว 94.4% คือตรวจพบเชื้อ 34 ตัวอย่างจาก 36 ตัวอย่างที่มีเชื้อ S.lugdunensis ในขณะที่ routine plate (blood agar และ chocolate agar) มีความไวเพียง 19.4% คือตรวจพบเชื้อ 7 จาก 36 ตัวอย่างที่มีเชื้อ

Reference : Ho PL. et al. Novel selective medium for isolation of Staphylococcus lugdunensis from wound specimens. J Clin Microbiol, July 2014.

 

 

 

Related posts:

Article written by

Ph.D student candidate at Medical Microbiology, Chulalongkorn University

Please comment with your real name using good manners.

Leave a Reply